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高通量組織研磨儀對植物葉片的液氮冷凍研磨實驗

文章來源: 作者:admin 人氣:1667 發(fā)表時間:2018-12-13 01:55:48

【文章導(dǎo)讀】“植物葉片的冷凍研磨實驗”, 如何應(yīng)用高通量組織研磨儀研磨植物葉片,以下小編為大家整理研磨植物葉片的詳細(xì)步驟:

處理材料:植物葉片 (水稻、玉米、小麥、草、蔬菜葉等)

  • 1  裝物料:將植物葉片截成所需的小段,用鑷子夾住,放入1.5/2ml的離心管管底,對離心管進(jìn)行編號?,F(xiàn)以24空離心管適配器為例;
  • 2  裝研磨珠:每個離心管內(nèi)裝上1個5mm碳化鎢(或氧化鋯)研磨珠,或3mm碳化鎢(或氧化鋯)研磨珠5個;
  • 3  冷凍保存:將鋁合金夾具夾住24孔,固定好,放到專業(yè)液氮盒中,加液氮冷凍,3-5分鐘,充分冷凍夾具及管內(nèi)樣品。
  • 4  溶劑加入:如有需要,在每個離心管中,小心加入裂解液或其他溶劑;
  • 4  主機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn):設(shè)定轉(zhuǎn)速與時間例如1500轉(zhuǎn)/分鐘  3min,點擊Start
  • 5  研磨過程:在典型研磨時間(2~3min)內(nèi),研磨結(jié)束??赏瑫r得到2*24=48個通量的樣品;
  • 6  取下夾具,進(jìn)行下一步實驗。

高通量組織研磨儀對植物葉片的液氮冷凍研磨實驗

注意事項:在上夾具時,要注意一是要帶上厚一點的手套,防止被液氮凍傷;一是要迅速,且要保證螺栓擰緊,卡上保險扣。然后,啟動研磨。高通量組織研磨儀同時適用動物組織(骨骼、肌肉、內(nèi)臟、毛發(fā)等)的研磨,高通量提取DNA/RNA。

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